框架思路

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BT Cry51Aa1对哺乳动物癌细胞产生选择性细胞毒性的原因

可能性：

一．BT Cry51Aa1选择性的进入不同的受试癌细胞

进一步：如何进入

（二．BT Cry51Aa1可以非特异地进入所有受试细胞，但可以特异性的产生效应

进一步：靶分子）

针对性措施（针对可能性一）： 1. BT Cry51Aa1的活化

（1） 材料的获取：BT Cry51Aa1 野生型蛋白的提取

（2） 确定Trypsin的作用结果：根据酶切、电泳的结果来寻找酶切的优先位点。

（是完全随机，还有每次结果可重复，有明显的优先酶切位点）

先要搞清楚胰酶本身的性质，液体体系？需要金属离子辅助么？作用温度？作用时间？和底物的浓度比值？



2. Activated Cry51Aa1 单品的获得

（1） 蛋白质空间结构预测，大致判断酶切位点

（2） 根据1.（2）和2.（1）的结果，构建多个载体 （3） 诱导目的蛋白，并纯化

3. Activated Cry51Aa1 单品 对细胞的作用

以①不加蛋白，②酶切前全长蛋白，③Activated Cry51Aa1 单品 分别作用于细胞，观察对细胞毒性效果。








氨基酸序列： ORIGIN

1 miflaildlk slvlnainyw gpknnngiqg gdfgypisek qidtsiitst hprliphdlt 61 ipqnletift ttqvltnntd lqqsqtvsfa kktttttsts ttngwteggk isdtleekvs 121 vsipfigegg gknsttiean fahnsstttf qqastdiewn isqpvlvppr kqvvatlvim 181 ggnftipmdl mttidstehy sgypiltwis spdnsyngpf mswyfanwpn lpsgfgplns 241 dntvtytgsv vsqvsagvya tvrfdqydih nlrtiektwy arhatlhngk kisinnvtem 301 aptspiktn //

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