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南京林业大学毕业设计(论文)开题报告
学生姓名 指导教师姓名 选题来源 选题名称
张颖 李 迅
学 号 职 称
080203424 专 业 副教授
所在学院 选题类型
生物资源 化学工程学院 毕业设计 毕业论文√
科研课题√ 生产实践 其它 /
南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母中表达研究
本研究拟采用来源于南极假丝酵母的脂肪酶B基因在毕赤酵母KM71H中诱导表达。
目的:通过采取不同的毕赤酵母表达载体(pPICZA和pGAPZA)进行重组表达,对比不同启动子对该酶表达量、脂肪酶活力以及酶学性质的影响。
意义:为进一步提高南极假丝酵母脂肪酶B的酶活和生物催化性能打下较好的基础。
南极假丝酵母脂肪酶B是一种优良的脂肪酶,它对水溶性、非水溶性物质都有很强的催化活性,在有机合成、手性化合物拆分、医药中间体等领域得到广泛应用。
研究概况:目前,CALB已成功应用于脂类合成和手性物质拆分。
实例:用CALB催化合成脂肪酸糖酯;用固定化CALB催化合成香茅醇的月桂
酸酯等。
拟采用含南极假丝酵母脂肪酶B基因的重组质粒直接在毕赤酵母中表达,需要查阅并总结毕赤酵母表达系统的使用方法,脂肪酶酶活的测定方法。 实验计划:
3月—3月中旬 克隆南极假丝酵母脂肪酶B基因,构建毕赤酵母表达载体。
研究的目的 及意义
国内外同类 研究概况
研究内容 及计划
3月中旬—4月上旬 培养重组菌株,以表达重组脂肪酶及粗酶酶活的测定。 4月上旬—5月上旬 对重组酶进行定性(最佳温度、最佳pH、温度稳定性、pH等)。 5月上旬—5月中旬 探讨不同启动子对南极假丝酵母脂肪酶B在毕赤酵母中表达的 影响。
5月中旬—5月下旬 整理准备毕业论文。
启动子是基因工程表达载体的一个重要元件,它不仅决定了基因的表达水平,也决定了基因表达的时空顺序。本实验的特色就是选择不同启动子的质粒构建重组毕赤酵母表达载体并对比,从而找到适合该脂肪酶表达的启动子。
特色与创新
指导教师 意 见
指导教师签名:
年 月 日
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